pcr——四步两段扩增法分离人碱性成纤维细胞生长因子(hbfgf)基因

引物是决定pcr结果的关键。本实验中,引物ⅰ、ⅱ虽有26个碱基,但由于其5’端有8个碱基为限制性内切酶的识别序列。所以实际上只有18个碱基与原始模板互补配对。采用标准的pcr方法时不能产生理想结果。经采用pcr——四步两段扩增法从人胎盘cdna文库中分离得到—484bp的dna片段。通过斑点杂交鉴定,结果表明该dna片段为hbfgf基因。