atpcs1基因的克隆、原核表达及抗血清的制备

利用rt-pcr扩增拟南芥螯合肽合成酶（atpcs1）基因全序列，与表达载体载体pet28a连接，构建成原核表达质粒pet28a-atpcs1并测序。将该质粒转化大肠杆菌bl21，用0.75mmiptg诱导融合蛋白atpcs1-his的表达，通过浸提法分离纯化该融合蛋白。用纯化的融合蛋白免疫小鼠，elisa法测定抗血清的效价可达1：2000，抗血清同纯化的融合蛋白及拟南芥总蛋白的western-blot结果表明，制备的抗血清能与重组融合蛋白和拟南芥提取物发生抗原抗体反应。