家蝇防御素抗菌肽基因的密码子优化及在毕赤酵母中的分泌表达

昆虫防御素是防御素的一种，也是近年来发现的一组新型抗菌活性肽。它是一类富含精氨酸的阳离子小肽，对革兰氏阳性细菌能产生较强的杀伤作用。根据genbank（ay260152）提供的家蝇(houseflies,muscadomestica)防御素（defensin）基因，选择毕赤酵母偏好密码子，化学合成了家蝇防御素抗菌肽成熟肽基因（des-hf）。将合成的家蝇防御素抗菌肽成熟肽基因（des-hf）克隆入ppiczα-a载体中构建分泌型重组酵母表达载体ppiczα-a-des-hf，转化pichiapastoris受体菌smd1168。在甲醇氧化酶(aox)启动子调控下，分子量约5kd的des-hf抗菌肽获得表达。初步抑菌活性测定，des-hf抗菌肽对革兰氏阳性菌有很强的抑菌活性。