stnfrⅱ和vip融合蛋白的基因克隆表达、纯化及活性检测

可溶性肿瘤坏死因子受体ⅱ（stnfrⅱ）和血管活性肠肽（vip）对类风湿性关节炎（ra）均有治疗作用，但两者的作用机制不同。制备两者融合表达蛋白，可能具有更好的防治类风湿关节炎的作用。用含有vip全基因序列的上游引物和stnfrⅱ的下游引物，用pcr扩增出由连接序列将vip和stnfrⅱ基因连接的片段，再亚克隆到原核表达载体pet32a，在大肠杆菌dh5α内诱导表达。表达的产物经离子交换、疏水层析纯化，并用体外中和试验检测其活性。结果显示：构建的pet32a-vip-stnfrⅱ表达载体在大肠杆菌dh5α内包涵体表达，离子交换层析纯化后的融合蛋白有较强的生物活性，为将来应用打下基础。