青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌中的高效表达

以获得大量胞外青霉素酶为目的，将青霉素酶基因克隆至表达载体pwb980中，并转化到双蛋白酶缺陷的bacillussubtilisdb104。重组菌在lb培养基中培养24小时后，sds-page分析发现目的蛋白分子量为28kda，酶活力为339u/ml；通过筛选7种不同的发酵培养基发现4#培养基更利于青霉素酶的表达，最大酶活力为1580u/ml，较优化前提高了3.66倍，并对该重组菌进行了7l罐放大实验，结果显示在培养24小时产酶达到高峰，酶活力为1255.8u/ml。