12－烷基化壳聚糖纳米粒-反义内皮素转换酶核酸表达质粒的制备及其性质的研究

目的：气道给予12－烷基化壳聚糖纳米粒（12－acss）包裹的反义内皮素转换酶（ece）核酸表达质粒，观察对ova致敏的小鼠变应性气道炎症的影响。方法：通过透射电镜观察12－acss/反义ece质粒复合体纳米粒的形成、形态及大小；应用凝胶阻滞、结合平衡、dna沉淀和dna酶消化实验等检测12－acss对反义ece核酸表达质粒的结合保护作用；通过mtt实验检测12－acss对细胞的毒性;通过离体培养细胞及活体动物转染实验观察12－acss能否携带反义ece核酸表达质粒成功转染。结果：电镜观察示纳米粒粒径在100－150nm之间。12－acss与反义ece核酸表达质粒在质量比为1：1时，全部反义ece质粒被结合。应用dnasei消化后可见，12－acss可保护核酸免受破坏。mtt检测结果显示12－acss对16hbe细胞在低浓度下几乎没有毒性。12－acss包裹的反义ece核酸表达质粒的纳米粒能成功转染离体培养的气道上皮细胞及活体动物。结论：12－acss能够成功包裹反义ece质粒并且成功转染16hbe及小鼠，其有可能作为一种基因治疗的载体选择之一。关键词：哮喘壳聚糖纳米粒内皮素转换酶基因治疗