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中国生物工程杂志 2009
免疫磁珠分选降低分化体系中胚胎干细胞的比例Keywords: 神经前体细胞,免疫磁珠分选,胚胎干细胞,ssea-1,分化 Abstract: 研究目的:采用免疫磁珠分选系统(magneticactivatedcellsorting,macs)分离去除小鼠胚胎干细胞(murineembryonicstemcells,mes)向神经细胞分化时培养体系中的es细胞,即对分化细胞进行纯化,以期减少移植致瘤性。方法:诱导mes细胞向神经细胞分化,取分化第四期的细胞,胰酶消化制成单细胞悬液,用mes特异性表面抗原ssea-1(specialstageembryonicantigen-1)单抗标记,间接免疫磁珠分选系统分离去除ssea-1阳性细胞,流式细胞仪检测分选前后细胞中mes细胞的比例,台盼蓝染色检测分选前后细胞存活率。结果:经macs分选后的阴性细胞中的ssea-1阳性率可以由分选前的(7.19±1.36)%下降到(1.34±0.80)%,结果具有显著性差异;分选后的细胞存活率仍为92%左右,与分选前存活率无明显变化。结论用ssea-1作为表面标志,用macs方法能有效地去除胚胎干细胞分化细胞中残存的胚胎干细胞,得到高纯度的分化细胞,并且细胞存活率不受影响,为下一步进行移植实验奠定基础。
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