重组腺病毒介导的人尿激酶原突变体在山羊乳汁中的表达

构建携带人尿激酶原突变体cdna的重组腺病毒，通过该腺病毒介导实现外源基因在山羊乳腺中表达。通过大肠杆菌内同源重组将人尿激酶原突变体cdna插入到腺病毒载体中，经过293细胞包装获得重组腺病毒，直接注射到泌乳山羊乳腺，收集感染后1~4天的乳汁，利用纤维蛋白溶圈试验、westernblot、elisa检测乳清中尿激酶原突变体的表达。结果显示病毒注射后1~4天乳清中均可检测到尿激酶原的表达，其表达量可达0.41mg/ml。该方法可以实现重组蛋白在山羊乳腺的短期表达，可能是大规模生产临床医疗蛋白的一条经济有效的途径。