组蛋白乙酰转移酶pcaf在原核细胞的表达及其生物学活性检测

p300/cbp相关因子（p300/cbpassociatedfactor，pcaf）是真核细胞内一种重要的组蛋白乙酰转移酶，它主要通过催化核心组蛋白的乙酰化，促进特定基因的转录，参与细胞内多种生物学过程。国内目前尚没有制备出具有生物学活性的组蛋白乙酰转移酶pcaf的报道。为此，pcaf全长cdna被克隆入原核表达载体pgex-5x-1，通过对诱导条件进行优化，实现了pcaf在大肠杆菌bl21（de3）菌株中的高效可溶性表达并进行了亲和纯化。利用体外乙酰转移酶活性分析实验，检测到所表达的gst-pcaf融合蛋白能够使组蛋白h3发生乙酰化。这种具有生物学活性的pcaf蛋白的成功制备为进一步研究pcaf的转录调控功能以及它与其它蛋白间的相互作用奠定了基础。