金发草lea3基因两个剪接体转化酿酒酵母的抗非生物胁迫功能分析

对金发草(pogonatherumpaniceum)第3组lea蛋白(pplea3)基因两个剪接体进行分析,并利用酿酒酵母表达系统分析两个剪接体在不同非生物胁迫的响应差异。以pplea3基因两个剪接体(pplea3.a和pplea3.b)的重组载体pmd19-t-pplea3.a和pmd19-t-pplea3.b为模板,pcr法构建酵母表达载体pyes2-pplea3.a和pyes2-pplea3.b,并转化酿酒酵母细胞得到重组菌inv-pplea3.a和inv-pplea3.b。通过比较重组菌和对照菌(转空载体pyes2)在nacl、nahco3、低温、干旱、uv胁迫下的恢复生长状况,结果表明两种重组菌胁迫后的生长情况明显好于对照菌,两个剪接体对非生物胁迫抵抗力的大小为:pplea3.a>pplea3.b。两个剪接体在核酸序列上的差异导致了在蛋白亲水性和结构上的差异,最终导致了在抗逆能力方面的差异。