耐底物腈水合酶融合子的产酶条件优化

采用正交设计法对耐底物腈水合酶融合子的发酵条件进行优化,以发酵液起始ph,发酵周期,接种量,装料系数作为考察因素,最终确定最佳发酵条件为:起始ph8.0、发酵周期54h、接种量12%、装液系数12%。在此优化条件下融合子腈水合酶的活力达到1100万u/ml,较优化前提高了83.3%。通过响应面法对发酵培养基配方进行优化研究,采用plackett-burman法对8个因素进行了筛选,结果表明,葡萄糖、尿素、磷酸氢二钾、磷酸二氢钾是影响发酵液腈水合酶产量的主效应因子。用最陡爬坡试验及centralcompositedesign设计进一步优化,利用design-expert软件进行二次回归分析,得到各因素的最佳浓度为:葡萄糖22.62g/l、尿素9.76g/l、k2hpo41.22g/l、kh2po41.268g/l。在此培养基优化配方下融合子腈水合酶的活力达到1280万u/ml,较原配方的酶活提高了16.4%。