重组大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位的中试发酵及纯化工艺

重组基因工程菌经中试发酵后,诱导表达出以包涵体形式存在的重组大肠杆菌不耐热肠毒素b亚单位(ltb)蛋白。采用qsepharosehighperfomance阴离子交换层析,将洗涤、裂解后得到的可溶性蛋白进行纯化,得到纯度高达98%的重组ltb蛋白。利用sephadexg-25分子筛层析法将重组ltb蛋白中的盐和尿素脱去,使蛋白复性,最终获得目的蛋白纯度为95%。将得到的重组ltb蛋白进行免疫双扩散实验,结果表明此蛋白具有良好的生物学活性。通过高效表达重组ltb蛋白的大肠杆菌发酵,确定了其中试发酵工艺,并建立了q柱一步纯化即可获得目的蛋白的方法,该工艺简捷、高效、易于工业化生产,为重组ltb蛋白的生产和应用奠定了基础。