高产雷帕霉素的游动放线菌菌种的选育

以游动放线菌(actinoplanes)bclp-016为出发菌株,采用常压室温等离子体(artp)诱变技术对其孢子进行处理,并将三个不同时间处理的孢子悬液混合。稀释涂布后,根据菌株菌落形态挑取部分单菌落进行初筛,经发酵复筛后,筛选得到了一株雷帕霉素高产菌株artp-039,其雷帕霉素的产量可达到369.39mg/l,较出发菌株bclp-016的产量256.86mg/l,提高了43.81%。以筛选出的artp-039高产菌为出发菌株,进行传统的紫外诱变,选取高、中、低三个致死率相对应的时间对其孢子悬液进行处理,并基于核糖体工程的理论选取了链霉素、庆大霉素、利福平、氯霉素和红霉素五种抗性物质,进行抗性初筛。发酵复筛后,最终筛选得到了一株雷帕霉素高产菌株st8+gen6+rif9+chl3+er4-015,该菌株同时具有五种抗性。该菌株的摇瓶实验结果表明,发酵7d后,其雷帕霉素的产量可达到589.79mg/l,较出发菌株bclp-016的产量,提高了129.61%,且其遗传稳定性良好。