头孢菌素c酰化酶突变位点的研究

头孢菌素c酰化酶能直接将头孢菌素c(cpc)转化为7-氨基头孢烷酸(7-aca),此一步酶法具有很大的经济价值,所以得到很多研究者的关注,特别是提高cpc酰化酶活性及专一性的研究。以cpc酰化酶基因ecs50为基础,利用重叠延伸pcr,对文献报道的活性提高的突变体酶s12的6个位点分别进行突变,将得到的6个突变体v122a、g140s、f297n、i314t、i415v、s710l进行诱导纯化后,检测酶活,以此来研究不同突变位点对酶活力的影响。结果v122a的比活为106u/mg,它的转化效率比初始酶提高23.7%。