人pparαlbd在大肠杆菌中的表达纯化及鉴定

过氧化物酶体增殖物活化受体α(peroxisomeprolifterator-activatedreceptorα，pparα)属于ⅱ型核受体，通过其配体结合区（1igandbindingdomain,lbd）结合特定的激动剂对参与机体代谢的关键酶、受体等的表达起调节作用。本研究从人肝组织提取总rna，rt-pcr扩增出pparαlbd的cdna，将其克隆入表达载体pmal-p2x麦芽糖结合蛋白（maltosebindingprotein,mbp）编码基因male序列的下游，重组质粒转化ecolitb1，进行了高效的可溶性融合蛋白表达。产物经多糖亲和树脂（amylose-resin）纯化后，获得了电泳纯的mbp-pparαlbd。mbp-pparαlbd用xa因子酶切，经amylose-resin亲和层析、de-52阴离子交换层析纯化回收，获得了电泳纯的pparαlbd。本研究为进一步比较mbp-pparαlbd和pparαlbd的功能，筛选pparα配体奠定了基础。