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中国生物工程杂志 2014
抗cd133胞外区骆驼多克隆抗体的制备及鉴定Keywords: cd133,多克隆抗体,新疆双峰驼,肿瘤干细胞 Abstract: 目的:制备高效价、高特异性的抗cd133胞外区新疆双峰驼来源的多克隆抗体,为制备高亲和力的抗cd133纳米抗体做准备。方法:将cd133胞外区基因序列构建到原核表达载体pet28a中,诱导表达及纯化cd133蛋白,免疫新疆双峰驼及新西兰兔。通过酶联免疫吸附实验(elisa)和westernblot检测多克隆抗体的效价及与cd133特异性结合活性。结果:elisa测定抗-cd133骆驼源抗体的效价可达到百万以上,通过westernblot检测多克隆抗体可特异性结合cd133蛋白。结论:重组人cd133蛋白可以在骆驼体内激发高滴度抗体反应,为今后构建骆驼免疫单域抗体噬菌体展示文库奠定基础。
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