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中国生物工程杂志 2014
免疫磁珠纯化小鼠精原干细胞的研究Keywords: 免疫磁珠分选,流式细胞分析,荧光定量pcr Abstract: 精原干细胞(spermatogonialstemcells,sscs)富集纯化是利用sscs进行基因修饰新方法等研究的前提基础。采用免疫磁珠分选法,使用干细胞抗体cd90.2进行小鼠sscs的纯化富集,并采用流式细胞分析法和定量pcr验证了磁珠分选效率。流式细胞分析结果:免疫磁珠分选后sscs纯度为50.11%。荧光定量pcr检测结果:磁珠分选后支持细胞特异表达基因gata4显著下调(6倍)、sscs表达基因gfrα-1上调(6.5倍)、生殖干细胞特异表达基因oct4极显著上调(5.9倍),3个基因相对表达量的变化说明,免疫磁珠分选效率为6倍。流式细胞分析法所产生的偏差可能是受到了未解离磁珠及sscs本身转基因荧光的影响。
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