利用同源重组的方法提高大肠杆菌w3110天冬氨酸的积累

大肠杆菌中存在3种天冬氨酸激酶，分别为lysc，metl，thra，使天冬氨酸磷酸化后分别进入lys、met、thr的合成途径.因此大肠杆菌菌体中无法积累大量天冬氨酸.以大肠杆菌w3110为出发菌株，利用red同源重组系统分别构建了lysc、thra和metl单基因缺陷株和lysc-thra和lysc-metl双基因缺陷株.采用高效液相色谱法测定l-天冬氨酸积累量.发现除metl单基因突变株外，其余突变株均积累了比野生型更多的l-天冬氨酸，这为代谢工程改造菌株并通过发酵法生产天冬氨酸奠定了基础.