基于启动子和宿主改造的酿酒酵母表达系统优化研究

生物医药领域中一套高效表达系统对于重组蛋白的生产至关重要。酿酒酵母作为一种食品级真核微生物,具有繁殖迅速、培养简单、遗传操作便捷等特点,是生产重组蛋白较理想的表达系统之一。对实验室已有的phr酿酒酵母表达系统进行优化。分别通过易错pcr技术和菌株诱变技术对酿酒酵母启动子ptef和宿主酿酒酵母y16进行突变改造,经筛选、鉴定获得表达性能提高的启动子ptefv1和酿酒酵母y16-e14、y16-e19。随后,利用启动子ptefv1构建以y16-e14为宿主的phr-n酿酒酵母表达系统,以绿色荧光蛋白和人血清白蛋白为对象,比较表达系统改造前后性能变化。结果显示phr-n酿酒酵母表达系统无论胞内表达绿色荧光蛋白还是分泌表达人血清白蛋白的能力均较改造前明显提高。phr-n系统为获得更多具有重要应用价值的重组蛋白提供了有利的工具。