重组a型产气荚膜梭菌α毒素c端基因在大肠杆菌中的高效表达

在成功克隆a型产气荚膜梭菌α毒素c端基因(cpa408基因)后,发现基因n端atg后密码子在大肠杆菌中的使用频率普遍偏低,在不改变氨基酸的前提下,对n端基因进行修饰,构建重组表达质粒pbv220cpa408,导入大肠杆菌dh5α中,经温度诱导,cpa408基因获得了高效表达,表达量达菌体总蛋白的4375%,表达产物以可溶形式存在。经westernblot分析,表达产物能被标准抗α毒素血清识别。