red同源重组技术研究进展

伴随着分子生物学的发展,一种基于λ噬菌体red重组酶的同源重组系统已应用于大肠杆菌基因工程研究。red重组系统由三种蛋白组成:exo蛋白是一种核酸外切酶,结合在双链dna的末端,从5′端向3′端降解dna,产生3′突出端;beta蛋白结合在单链dna上,介导互补单链dna退火;gam蛋白可与recbcd酶结合,抑制其降解外源dna的活性。red同源重组技术具有同源序列短(40～60bp)、重组效率高的特点。这种技术可在dna靶标分子的任意位点进行基因敲除、敲入、点突变等操作,无需使用限制性内切酶和连接酶。此外,这种新型重组技术可直接将目的基因克隆于载体上,目的基因既可来源于细菌人工染色体也可是基因组dna。red同源重组技术使难度较大的基因工程实验顺利进行,大大推动功能基因组研究的发展。