人血小板因子4在大肠杆菌中的高效表达及活性研究

为了提高人血小板因子4(humanplateletfactor4,hpf4)的表达,在pt77hpf4表达质粒的基础上,采用pcr定位突变技术,改造人血小板因子4(hpf4)cdna基因片段,去除cdna3′端非翻译区at富含序列,改用大肠杆菌强串联终止密码子taataa,成功构建了高效表达质粒pbv220hpf4。摇瓶发酵重组人血小板因子4的产量达160mgl较原表达质粒pt77hpf4表达量提高了近80倍。经包涵体的洗涤、变性、复性后,采用鸡胚绒毛尿囊膜血管生成抑制实验测定复性后rhpf4的生物学活性,结果显示:rhpf4具有抑制血管生成活性。