ap-2γ基因的克隆、表达及其部分生物活性的测定

ap2γ基因是ap2基因家族中非常重要的转录激活因子,它对脊椎动物的胚胎发育起着十分重要的作用,并与细胞的生长及癌变有一定的联系。将人的ap2γ基因插入表达载体gst系统中的pgex4t2的谷胱苷肽s转移酶基因下游,转化e.colidh5α,鉴定挑选出阳性菌落并扩大培养,提取重组质粒进行dna测序,确定其阅读框码的正确性。再将正确的重组质粒转化e.colibl21,用异丙基硫代半乳糖苷(iptg)诱导后,在tac启动子作用下,表达出一条81kda的蛋白质带,所得蛋白质用谷胱苷肽琼脂糖4b纯化后,得到融合蛋白质,通过凝胶迁移率变动分析和免疫印迹分析实验,测得该蛋白质的部分生物活性,结果表明,它具有很好的生物学活性,为进一步对ap2γ基因的功能进行研究打下了良好的基础。