糖多孢红霉菌多拷贝表达载体pzm的构建

对糖多孢红霉菌染色体上红霉素生物合成基因进行改造,已经合成了多种红霉素类似物。在糖多孢红霉菌中对红霉素类似物进行结构修饰,以pwor109质粒为基础构建糖多孢红霉菌多拷贝表达载体pzm。pzm载体带有perme启动子、fd终止子、多克隆位点、硫链丝菌肽和氨苄青霉素抗性基因、以及在大肠杆菌和糖多孢红霉菌中复制的cole1ori和pjv1ori复制子,系可在大肠杆菌和糖多孢红霉菌中扩增的穿梭质粒。在糖多孢红霉菌中,pzm可以表达氨普霉素抗性基因和绿色荧光蛋白基因,从糖多孢红霉菌中提取的表达质粒酶切图谱与转化前一致,表明pzm是糖多孢红霉菌中多拷贝、稳定的表达载体。