绿色荧光蛋白标记的表达载体phis-egfp的构建

为对重组蛋白的表达进行直观检测并简化蛋白纯化的步骤,构建了能在大肠杆菌中表达融合蛋白的通用表达载体phis-egfp。该载体含有源自表达载体pet-32a的t7启动子、终止子和源自质粒puc18的cole1复制子与绿色荧光蛋白报告基因。应用该载体成功地表达并纯化了酵母ggdp(geranylgeranyldiphosphate,ggdp)合酶融合蛋白,结果表明所构建的载体是一个实用的表达载体,并建立了离子交换层析和亲和层析两步纯化融合蛋白的方法。