thermusthermophilushb27锰过氧化氢酶在大肠杆菌中的表达及酶学性质分析

碱性嗜热过氧化氢酶是一种重要的纺织用酶。根据大肠杆菌密码子使用偏爱性，对thermusthermophilushb27来源的含锰过氧化氢酶基因进行密码子优化，将优化后的基因连接至表达载体pet28a（+）上，转化到e.colibl21（de3）中进行诱导表达。结果表明在含有14mmol/lmn2+浓度的培养液中以0.2mmol/l的iptg42℃条件下诱导2h的情况下，菌体破碎上清液中的酶活力可达25u/ml。利用ni亲和层析柱对该mn-cat进行纯化，酶学性质研究表明：此酶的最适温度为70℃，最适ph为ph10.0，在80℃保温2h，酶活力不损失；ph9.0~11.0的环境中放置2h后，酶活仅损失约10%，此酶具有良好的工业开发潜力。