利用gfp表达系统检测雌激素类化合物的研究

根据雌激素类化合物的转录调节原理，构建受雌激素应答元件（ere）调控的3×ereegfp-n1重组报告基因载体，转染雌激素受体阳性的mcf-7乳腺癌细胞，分离出稳定转染的细胞克隆ere-gfp-mcf7，将不同浓度的雌二醇（e2）及其他化合物加入稳定转染的细胞后检测gfp表达水平的变化。雌二醇（e2）以剂量依赖的方式诱导稳定转染细胞ere-gfp-mcf7表达gfp，最大效应浓度为1×10－10mol/l,ec50为1.5×10－11mol/l；已知的植物雌激素大豆甙元和白藜芦醇同样以剂量依赖的方式诱导gfp的表达，ec50分别为2.4×10－7mol/l和6.2×10－6mol/l，而葡萄籽多酚没有明显的雌激素样活性。雌激素拮抗剂他莫西芬以剂量依赖的方式抑制雌二醇诱导gfp的表达，最大抑制浓度为1×10－7mol/l。利用此细胞模型检测不同化合物诱导的gfp表达强度可快速检测雌激素受体的配体。