白血病耐药细胞系u937/adr的建立及其生物学性状

目的：建立白血病耐药细胞系u937/adr模型，并检测其多药耐药相关基因及其生物学性状的改变。方法：以大剂量阿霉素(ic50浓度)，短时间(2h)暴露法诱导人白血病细胞系u937细胞的阿霉素耐药性。检测细胞的生长曲线，计算阿霉素耐药倍数，流式细胞术分析细胞周期分布；罗丹明123检测药物外排功能；荧光定量pcr（fq-pcr）检测mdr1、mrp1、nf-κb、bcl-2、baxmrna水平变化；westernblot检测akt、p-akt、p65、p-gp、mrp1和bcl-2蛋白水平变化。结果：成功构建耐阿霉素u937/adr细胞系，对阿霉素耐药指数为亲代u937细胞的11倍，u937/adr群体倍增时间为43.6h，高于亲代细胞8.9h；流式细胞分析显示与u937细胞相比，u937/adr的g0/g1期细胞增多，而g2/m期细胞减少。并对多种化疗药物产生交叉耐药性。罗丹明123外排试验显示，u937/adr细胞外排明显增加。u937/adr细胞mdr1、nf-κb、bcl-2mrna表达水平明显增加，p-gp及p-akt、p65表达水平增加。结论：成功构建的u937/adr细胞系其生物学特性明显不同与亲代u937细胞，对多种化疗药物产生多药耐药，高表达多药耐药蛋白p-gp，同时激活p-akt及nf-kb。