sa-hil2双功能融合蛋白的研制及其生物学鉴定

目的：制备链亲和素标记的人白细胞介素-2(sa-hil2)融合蛋白，并研究其生物学功能。方法：构建sa-l-il2-pet24重组表达质粒，在大肠杆菌中表达sa-hil2融合蛋白，对表达的sa-hil2融合蛋白采用镍金属螯合（ni-nta）层析柱进行纯化，透析复性。cck-8法检测sa-hil2融合蛋白对pha刺激的人外周血淋巴细胞的增值活性，流式细胞仪分析sa-hil2融合蛋白对生物素化的b16.f10肿瘤细胞表面锚定修饰效率。结果：sa-hil2在大肠杆菌中实现了高效表达，约占菌体总蛋白的20％，制备的sa-hil2融合蛋白纯度达到95％，并具有双重活性，即hil-2促进pha刺激的人外周血淋巴细胞的增值活性和sa介导的高效结合至已生物素化的b16.f10肿瘤细胞表面的功能（表面锚定修饰效率约95％）。结论：研制的sa-hil2融合蛋白具有双重活性，可为研制表面修饰的新型肿瘤细胞疫苗提供基础。