密码子优化型hpv16l1基因在两种昆虫细胞中的表达

目的:提高16型人乳头瘤病毒（hpv16）l1基因在杆状病毒昆虫细胞中的表达水平，为研制预防性hpv疫苗奠定基础。方法:根据昆虫细胞密码子偏性对野生型hpv16l1基因进行改造，利用bac-to-bac表达系统获得重组杆状病毒，感染昆虫细胞sf9和highfive。westernblot鉴定表达产物；电镜下观察病毒样颗粒形成。利用elisa法评价hpv16l1基因的优化效果，探讨l1蛋白表达的最佳条件。结果:在相对分子质量56kda处出现hpv16l1的特异性条带；电镜下可见病毒样颗粒在昆虫细胞的核内形成；优化型hpv16l1基因的表达水平显著高于野生型。highfive细胞表达的最佳条件为moi=10,表达时相72h，其l1蛋白表达量至少比sf9细胞高3倍。结论:密码子优化技术确实能够促进hpv16l1蛋白的高效表达，而highfive细胞表现出的显著优势尤其值得关注。