lpts抗体的制备和活性检测

lpts是利用定位候选克隆策略,得到的一个新的肝相关候选肿瘤抑制基因(anovelliverrelatedputativetumorsuppressor),为了进一步研究其结构与功能,利用dna重组技术,将lpts的cdna克隆到融合表达载体pet24a中,在e.coli中表达,以ni+柱亲和层析,获得纯化的6×hislpts融合蛋白。以此为抗原免疫新西兰大白兔获得多克隆抗体,elisa法检测其滴度达20000以上,经亲和层析纯化,western印迹结果表明,该纯化抗体可与真核表达的halpts蛋白和内源性的lpts蛋白特异性结合;免疫荧光分析显示smmc7721细胞内源性表达的lpts蛋白呈点状分布于细胞核内。以上结果表明获得了效价高,活性强的针对lpts蛋白的多克隆抗体,可用于对lpts的结构和功能研究。