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中国中医药信息杂志 2011
化瘀祛痰方药对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞氧化应激保护作用的研究Keywords: Huayuqutan recipe, drug-containing serum, atherosclerosis, oxidation stress, EA.hy926 cell, ROS Abstract: 目的 探讨化瘀祛痰方药含药血清对H2O2诱导人脐带静脉内皮细胞(EA.hy926细胞)氧化应激的保护作用。方法 体外培养EA.hy926细胞,随机分为5组。正常对照组:仅用DMEM完全培养基培养,不加任何药物;H2O2刺激组:培养液中加入终浓度为300 μmol/L H2O2;含药血清低剂量组、含药血清中剂量组、含药血清高剂量组分别使用5%、10%、20%含药血清预处理24 h后加入终浓度为300 μmol/L H2O2。各组细胞培养24 h后进行各项指标测定。采用MTT法检测细胞活性,黄嘌呤氧化酶法测定超氧化物歧化酶(SOD)活力,2,4-二硝基苯肼显色法检测乳酸脱氢酶(LDH)活性,硫代巴比妥酸法测定丙二醛(MDA)含量,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)活性。采用细胞活性氧检测试剂盒,通过荧光显微镜观察细胞内活性氧水平的变化。结果 与正常对照组相比,H2O2刺激后细胞活性明显下降,SOD、NO活性显著降低,而LDH活性、MDA含量则显著增加,活性氧水平明显升高。10%、20%化瘀祛痰方药含药血清可显著提高细胞存活率及SOD、NO活性,而显著降低LDH活性、MDA含量及活性氧水平。结论 化瘀祛痰方药对H2O2诱导EA.hy926细胞氧化应激具有保护作用,这可能是其抗动脉粥样硬化的作用机制之一
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