莪芪抗瘤方剂诱导白血病HL-60细胞凋亡的血清药理学研究

目的 研究中药复方莪芪抗瘤方剂在体外对白血病HL-60细胞凋亡的作用,并探讨凋亡发生与细胞内Ca2+、Caspase-3、Bcl-2的关系。方法 通过血清药理学方法,选择10%浓度的含药血清与白血病HL-60细胞共同培育24、48、72、96 h后,应用荧光显微镜观察细胞形态,流式细胞仪检测凋亡峰(亚二倍体峰),用Fura-2荧光负载方法测定细胞内Ca2+浓度的变化。比色法检测凋亡相关基因Caspase-3活性变化。亲和免疫组化LSAB 法检测HL-60细胞Bcl-2基因表达。结果 10%浓度的含药血清处理组细胞体积缩小,细胞核固缩,膜起泡,核断裂及形成凋亡小体等,以72 h最为明显；可见DNA含量低于G1期的凋亡细胞群,这群细胞的凋亡百分率随时间的递增而增加。10%浓度的含药血清处理组的细胞内Ca2+浓度也明显高于对照组(P<0.01),Caspase-3浓度明显高于对照组(P<0.01),Bcl-2基因表达明显低于对照组(P<0.05)。结论 莪芪抗瘤方剂含药血清诱导白血病HL-60细胞发生凋亡,这种变化可能与细胞内Ca2+、Caspase-3水平上调及Bcl-2表达下调有关