人端粒酶催化亚单位(htert)反义分子探针细胞摄取动力学与生物学性质

？目的：研究人端粒酶催化亚单位(htert)反义分子探针(99mtc-htertason)在体外靶细胞摄取动力学情况,以及特异识别靶基因的生物学性质。方法：以双功能螯合剂法,制备放射性核素99mtc标记的针对htertmrna的反义分子探针(99mtc-htertason)。培养htert表达阳性的人肝细胞癌细胞株(hepg2细胞)。观察在有/无脂质体介导下,细胞对99mtc-htertason的摄取动力学情况。阳离子脂质体介导99mtc-htertason转染细胞,逆转录聚合酶链反应(reversetranscriptasepolymerasechainreaction,rt-pcr)分析其特异识别靶基因的生物学活性。结果：99mtc-htertason的标记率达到(76±5)%(n=5),放射性化学纯度达到96%,比活度为1.850×106bq/μg。不论脂质体介导与否,99mtc-htertason在不同时相的细胞摄取率均高于对照组(p＜0.05);脂质体明显提高细胞对99mtc-htertason的摄取(p＜0.05);通过脂质体介导,细胞对99mtc-htertason的摄取高峰值提前至2h,并保持稳定水平至3h。rtpcr结果显示99mtc-htertason转染细胞后,htertmrna表达量明显降低。结论：脂质体在体外能有效提高99mtc-htertason的细胞摄取率。分子探针99mtc-htertason能特异识别靶基因。为进一步开展99mtc-htertason体内研究奠定了基础。