尿多酸肽联合丁酸钠抑制乳腺癌细胞生长的体外实验研究

？目的:探讨尿多酸肽(uroacitide,cdaⅱ)与组蛋白去乙酰化酶抑制剂丁酸钠(sodiumbutyrate,sb)联合应用能否使人乳腺癌细胞mcf7维甲酸β2受体(retinoicacidreceptorβ2,rarβ2)基因启动子去甲基化并诱导基因表达;以及联合用药能否协同抑制细胞生长、诱导细胞调亡.方法:培养乳腺癌细胞mcf7,分为cdaⅱ、sb两个单药组和两药联合组.分别用甲基化特异性聚合酶链反应(methylation-specificpolymerasechainreaction,msp)和反转录-聚合酶链反应(reversetranscriptionpolymerasechainreaction,rt-pcr)检测rarβ2基因启动子甲基化状态和表达;hoechst33342/碘化丙啶(propidiumiodide,pi)染色和dna末端原位标记染色法(terminaldeoxynucleotidyltransferasemediateddutp-biotinnickendlabeling,tunel)检测调亡;甲基噻唑基四唑(mtt)比色法检测细胞增殖.结果:cdaⅱ或sb单药均不能使rarβ2基因启动子去甲基化,也不能诱导基因表达,联合用药使基因启动子发生部分去甲基化并诱导了基因mrna的表达;hoechst33342/pi后,荧光显微镜下可见联合用药组出现明显的凋亡细胞,tunel法显示联合用药组细胞凋亡率显著高于两个单药组(39.5%vs5.2%,8.1%,p＜0.05);mtt比色法显示与单独用药相比,联合用药对肿瘤细胞的生长抑制作用更显著,两药呈现交互作用(f=15,p＜0.05).结论:cdaⅱ与组蛋白去乙酰化酶抑制剂sb具有协同抑制乳腺癌细胞增殖、诱导细胞凋亡的作用,这可能与两药联合应用能够使rarβ2基因启动子去甲基化并诱导基因表达相关.