用maps制备新肿瘤相关基因1a6/drim的多克隆抗体

？目的:获得1a6/drim的n端特异性抗体并对其在细胞内的定位进行分析.方法:针对1a6/drim的n端多肽用多通道同步固相全自动合成系统合成,以无免疫原性的赖氨酸结构为核心偶联,将此多聚抗原肽(mutipleantigenicpeptides,maps)免疫新西兰大白兔,从免疫兔血清中获得1a6/drim的多克隆抗体.结果:用westernblot技术证明了1a6/drim的n端抗体,与c端特异性单克隆抗体识别相同的1a6/drim基因表达的310000蛋白条带,经过westernblot和免疫荧光的方法初步证实1a6/drim在多种胃癌细胞系、乳腺癌细胞系以及肝癌细胞系中表达,免疫荧光显示1a6/drim主要定位在细胞核内.结论:对于用谷胱苷肽巯基转移酶(glutathion-s-transferase,gst)融合蛋白方法不能诱导表达的蛋白,可利用合成maps制备抗原的方法获得抗体.本研究用此方法制备的抗体特异性识别1a6/drim蛋白产物并证明该基因主要在多种肿瘤细胞的核内表达.