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北京大学学报(医学版) 2006
利用nf-κb转录活性萤光素酶报告系统检测白细胞介素1及白细胞介素1受体拮抗剂的生物活性Keywords: nf-κb,白细胞介素1,受体,白细胞介素1,萤光素酶 Abstract: ?目的:利用nf-κb转录活性萤光素酶报告系统,建立新的白细胞介素1(interleukin-1,il-1)和白细胞介素1受体拮抗剂(interleukin-1receptorantagonist,il-1ra)生物学活性的检测方法.方法:运用萤光素酶转录报告系统,选用小鼠胸腺瘤细胞系el4细胞(el4的某些亚克隆细胞表面具有高密度il-1受体表达),以pnf-κb-luc质粒和内对照prl-tk质粒共转染,并加入il-1β激活,以双萤光素酶报告基因检测系统检测il-1β及其抑制剂il-1ra的生物学活性.结果:这种方法检测到il-1β激活nf-κb报告基因表达萤光素酶,并且这种激活可被il-1ra所抑制,实验重复性好.il-1β在5μg/l为激活nf-κb报告基因表达萤光素酶的最佳浓度,并可被il-1ra50μg/l最大抑制.结论:这种检测方法的建立为今后对il-1β和il-1ra的生物学活性检测提供了新的途径.
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