细胞色素p450介导的补骨脂酚代谢减毒

？目的：分析补骨脂酚代谢的细胞色素p450（cytochromep450，cyp）表型，并在体外研究人肝微粒体（humanlivermicrosomes，hlm）对补骨脂酚代谢减毒的机制。方法:用hlm与化学抑制剂合用法以及人源重组cyp酶法分析代谢补骨脂酚的cyp酶亚型。用hplc-ms法分析cyp亚型酶特异底物的代谢产物生成量，研究cyp酶广谱抑制剂1-氨基苯并三唑（1-aminobenzotriazole，abt）对hlm中cyp亚型酶活性的抑制作用。用hplc法分析补骨脂酚在hlm孵育液中的浓度，研究abt对其代谢的影响。应用mtt法检测人肾近曲小管上皮细胞（humankidney-2，hk-2）的存活率来评价补骨脂酚对hk-2的毒性作用以及hlm中cyp酶和abt对其毒性的影响。结果:hlm中的cyp1a2、cyp2c9、cyp2c19和cyp3a4参与了补骨脂酚的代谢，其中以cyp2c19的代谢转化率最高；2.5mmol/labt能明显抑制0.5g/lhlm中上述4种cyp同工酶活性，抑制率达到90%以上；2.5mmol/labt对补骨脂酚在hlm的代谢抑制率为83.24%±2.13%。在hk-2细胞存活率实验中，abt能显著降低hlm对30～90μmol/l补骨脂酚的代谢减毒作用（p<0.05）。结论:hlm减低补骨脂酚hk-2细胞毒性的作用与hlm中cyp酶将补骨脂酚代谢转化为无毒或毒性较小的代谢产物有关，应用cyp酶广谱抑制剂能逆转hlm对补骨脂酚的代谢解毒作用。