h2s对氧化型低密度脂蛋白诱导人单核巨噬细胞核转录因子-κb的影响及机制

？目的：研究硫化氢（hydrogensulfide,h2s）对氧化型低密度脂蛋白(oxidizedlow-densitylipoprotein,ox-ldl)诱导人单核巨噬细胞nf-κb通路的调节作用及其机制。方法：人单核细胞系thp-1细胞采用12-豆蔻酸-13-乙酸佛波醇（phorbolmyristateacetate，pma）诱导分化为巨噬细胞后，分为4组：对照组、ox-ldl组、ox-ldl+h2s100μmol/l组及ox-ldl+h2s500μmol/l组。用westernblot检测细胞iκbα蛋白表达及nf-κb磷酸化水平，激光共聚焦法检测细胞胞浆iκbα及nf-κb的核转位改变，免疫共沉淀方法检测细胞核中nf-κbp65与iκbα结合情况。结果：westernblot结果显示，与对照组相比，ox-ldl组人单核巨噬细胞中nf-κbp65磷酸化水平明显升高（0.855±0.116vs.0.502±0.218，p=0.046），iκbα表达明显减少(0.612±0.216vs.0.997±0.167，p=0.029)；与ox-ldl组相比，ox-ldl+h2s100μmol/l组及ox-ldl+h2s500μmol/l组细胞中nf-κbp65磷酸化水平显著降低（0.424±0.225vs.0.855±0.116，p=0.020；0.378±0.071vs.0.855±0.116，p=0.011），iκbα表达显著增多(1.037±0.111vs.0.612±0.216，p=0.015；1.046±0.084vs.0.612±0.216，p=0.013)。激光共聚焦结果显示：与对照组相比，ox-ldl组thp-1源性巨噬细胞胞浆中iκbα表达明显降低，nf-κbp65核转位明显增加；与ox-ldl组相比，ox-ldl+h2s100μmol/l组及ox-ldl+h2s500μmol/l组细胞胞浆iκbα表达显著增多，nf-κbp65核转位明显减少。免疫共沉淀结果显示，对照组人单核巨噬细胞胞核内未检测到nf-κbp65与iκbα的结合，ox-ldl组细胞核内nf-κbp65与iκbα结合较少，ox-ldl+h2s100μmol/l组及ox-ldl+h2s500μmol/l组细胞核内nf-κb与iκbα结合明显增多。结论：h2s可抑制ox-ldl诱导人单核巨噬细胞中nf-κb通路激活，其作用机制可能与抑制胞浆中iκbα降解，减少nf-κbp65磷酸化激活及核转位，同时可促进胞核中iκbα与nf-κb的结合，进而抑制nf-κb的活性有关。