dapt对人牙髓细胞notch信号通路和细胞增殖的影响

？目的：探讨γ-分泌酶抑制剂3,5-二氟苯乙酰-l-丙氨酰-s-苯基甘氨酸t-丁酯｛n-［n-(3,5-difluorophena-cetyl-l-alanyl)］-s-phenylglycinet-butylester,dapt｝对人牙髓细胞notch信号通路是否有抑制作用，及对牙髓细胞增殖能力的影响。方法：收集临床上完整拔除的健康前磨牙或第三磨牙，采用酶消化法进行人牙髓细胞的原代培养和传代培养。从第4代开始在正常培养基中加入终浓度为5μmol/l的γ-分泌酶抑制剂dapt，选择第4、8、10代细胞为检测细胞，采用实时荧光定量rt-pcr方法和基因芯片检测notch信号通路相关基因的表达变化，用四甲基偶氮唑盐（methylthiazolyltetrazolium,mtt）法测定细胞活性，绘制牙髓细胞增殖曲线，评价牙髓细胞的增殖状况。结果：加入dapt后，实验组牙髓细胞notch信号通路的下游基因hes1、hey1、nr4a2表达下降，同时，第8、10代牙髓细胞的增殖减慢，与对照组相比，差异有统计学意义。结论：γ-分泌酶抑制剂dapt能有效抑制体外培养人牙髓细胞的notch信号通路，使人牙髓细胞增殖减慢，影响细胞的正常生命周期。