肾上腺素受体介导心脏纤维化模型中核转录因子nf-κb的活化

？目的：应用非选择性β肾上腺素受体激动剂——异丙基肾上腺素(isoproterenol，iso)连续皮下注射7d诱导心脏纤维化模型，并观察此模型中炎症调控核转录因子nf-κb的变化。方法：采用10周龄体重为280~320g的sd大鼠，iso以0.25mg/(kg·d)剂量连续背部皮下注射7d诱导心脏纤维化模型。心脏组织切片进行苦味酸-天狼猩红染色观察纤维化，以胶原容量分数进行胶原面积定量统计。应用real-timepcr法检测心脏组织中ⅰ型/ⅲ型胶原及炎症因子il-6的mrna表达。组织切片进行he染色观察心脏病理变化。免疫组织化学方法检测心脏组织中nf-κb在细胞内的定位,westernblot法检测心脏组织中磷酸化的nf-κb水平。结果：iso诱导的心脏纤维化模型中天狼猩红染色面积明显大于对照(control，con)组，且iso组的胶原容积分数显著高于con组（12.01±1.64vs.0.95±0.06,p＜0.001）；iso组ⅰ、ⅲ型胶原的mrna表达显著高于con组（ⅰ型胶原：10.51±0.47vs.0.98±0.02，p＜0.001；ⅲ型胶原：9.58±1.33vs.1.02±0.02,p＜0.001）。iso组心脏组织中可见细胞核增多、聚集，提示可能炎症细胞浸润，且炎症因子il-6的mrna表达水平明显增加（1.64±0.18vs.1.04±0.07,p<0.01）。con组nf-κb主要定位于心肌细胞胞浆中，心肌细胞核中未见nf-κb的定位；iso组出现明显nf-κb核转位活化，心肌细胞胞浆中的nf-κb较con组减少，心肌细胞核及间质细胞核均可见明显的nf-κb定位，同时，iso组心脏组织磷酸化nf-κb的水平明显高于con组(10.83±2.05vs.1.05±0.27,p＜0.001)。结论：连续7d皮下注射iso可成功诱导心脏纤维化模型，且此模型心脏组织中活化的核转录因子nf-κb增加。