辛伐他汀纳米脂质体对骨髓间充质干细胞成骨分化的影响

？目的：通过对骨形成蛋白-2（bonemorphogeneticprotein2，bmp-2）和碱性磷酸酶（alkalinephosphatase，alp）的表达进行测定，研究纳米脂质体剂型对辛伐他汀（simvastatin，smv）在骨髓间充质干细胞（bonemarrowstromalcells，bmsc）形成骨过程中的促进作用。方法：采用全骨髓贴壁培养法体外培养小鼠原代bmsc。以smv原料药处理组作为对照组，分别设smv药物浓度1μmol/l和2μmol/l为smv低剂量组（smvlowdosagegroup，s1）和smv高剂量组（smvhighdosagegroup，s2）；将辛伐他汀纳米脂质体（simvastatinnano-liposomes，smv-liposome）处理组作为实验组，根据smv药物包载浓度1μmol/l和2μmol/l分别设为smv-liposome低剂量组（smv-liposomelowdosagegroup，sl1）和smv-liposome高剂量组（smv-liposomehighdosagegroup，sl2）；此外，实验中所有涉及到不做任何处理的组，都作为空白组（blank）。将smv和smv-liposome分别与bmsc共孵育48h后，用碱性磷酸酶比色法测定其alp比活性，用碱性磷酸酯酶显色试剂盒（bcip/nbtalkalinephosphatasecolordevelopmentkit，bcip/nbtkit）检测其alp蛋白表达量，用westernblot检测其bmp-2蛋白的表达量。结果：细胞毒性实验结果显示，对照组与实验组在与bmsc共孵育48h后，各组细胞生存率均高于84%，且组间差异无统计学差意义（p>0.05）。在给药浓度相同时，实验组alp比活性显著高于对照组，其中s1组和sl1组alp比活性分别为0.27±1.11和0.21±2.15（p<0.001），s2组和sl2组alp比活性分别为0.63±1.64和0.72±2.88（p<0.05）。alpbcip/nbt染色结果表明，与对照组相比，实验组alp染色更深，且组内呈现剂量依赖性。实验组bmp-2蛋白表达量显著高于对照组。同时，alp比活性、alpbcip/nbt染色及bmp-2蛋白表达结果表明，对照组和实验组内均呈现剂量依赖性，即高剂量组结果优于低剂量组。结论：纳米脂质体剂型能显著提高smv促进bmsc的成骨分化作用。