用dapi和hoechst33342染色法检测dna的流式细胞方法探讨

？目的：探索利用dapi和hoechst33342两种荧光染料检测dna的流式细胞技术。方法：分别用dapi、hochest和pi3种荧光染料标记ht-29细胞，通过流式细胞仪检测其g0/g1期、s期和g2/m期的dna含量，比较3种方法测定结果。用标准荧光微球和dna质量控制试剂盒做测试质控。结果：质控实验显示，紫外激光的变异系数（cv）为2.4；dapi和hoechst33342标记的小鸡红细胞核(chickenerythrocytenuclei，cen)出现4个峰，第2、第3和第4峰所在道数的平均值与第1峰的比值为2、3、4，且第1峰的cv均为2.4。dapi、hoechst33342标记小牛胸腺细胞核（calfthymocytenuclei,ctn）出现2个峰，g2/g1为1.97，且g0/g1峰的cv为2.4。dapi、hoechst33342和pi3种染料标记的ht-29细胞呈现完整的细胞周期峰，结果分别为cv值3.40、3.02和4.42，g0/g1期含量为60.86%、60.22%和60.81%，s期含量为28.85%、29.70%和29.82%，g2/m期含量为10.29%、9.09%和9.37%，3种标记法测定结果一致。结论：本文探索的dapi和hoechst33342标记法简单易行，可作为具备紫外激光器的流式细胞仪的首选dna荧光染料。