ⅱ型胶原多肽263～272序列中多个氨基酸替换的意义及其在胶原性关节炎治疗中的作用

？目的:研究ⅱ型胶原变构肽(apl)中氨基酸替换对胶原性关节炎(cia)的抑制作用,为类风湿关节炎(ra)的多肽免疫治疗提供试验依据.方法:以丙氨酸替换ⅱ型胶原(cⅱ)263～272多肽中与t细胞受体(tcr)结合的氨基酸,3h掺入法检测变构肽对ra患者外周血t细胞活化的竞争抑制作用,筛选用于cia治疗的变构肽.以牛cⅱ诱导大鼠cia模型,应用不同剂量(1,10,100μg)的cⅱ变构肽每周2次皮下注射,观察大鼠关节肿胀的变化情况.治疗3周后(初次免疫后第35天)处死大鼠,进行x线及病理评分.elisa法检测血清ifn-γ水平.结果:3条cⅱ263～272变构肽均不同程度抑制cⅱ原型肽对ra患者t细胞的活化.其中,同时替换267位谷氨酰胺(q)、270位赖氨酸(k)和271位甘氨酸(g)为丙氨酸(a)的apl3效果最好.应用apl3对cia进行治疗的结果发现,100μg治疗组cia大鼠的关节炎指数、x线及病理评分均显著低于pbs对照组.血清ifn-γ水平也较pbs对照组明显下降.而无关肽组与pbs对照组相比,关节炎指数、x线和病理评分以及血清ifn-γ水平均无明显差别.结论:tcr结合氨基酸位点替换后的cⅱ263～272多肽具有t细胞低反应性和对原型肽的竞争抑制作用,并可抑制大鼠胶原性关节炎的发展,提示其抑制ra免疫异常的可能性.