抗原修复液ph值及修复时间对免疫组化染色效果的影响

？目的:探讨使p504s、p63、cd10、ki-67抗原抗体复合物在免疫组化检测中获得高表达的抗原修复条件.方法:取前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和人乳头状瘤病毒感染的外阴上皮组织,用10%(体积分数)中性缓冲甲醛固定液固定.用envision二步法行免疫组化染色,p504s、p63、cd10、ki-67分别作为前列腺癌、良性前列腺增生、乳腺增生组织和感染人乳头状瘤病毒的外阴上皮组织的一抗,使用统一的envisiontm二抗.每种组织皆分别使用3种不同的缓冲液进行抗原修复:ph6.0的枸橼酸缓冲液、ph8.0的乙二氨四乙酸二钠(edta)缓冲液和ph9.0的edta-tris缓冲液.对每一种抗原修复液,应用4个不同的抗原修复时间:12min、20min、25min和30min.染色完成后,镜下对比不同条件下抗原抗体复合物表达的情况.结果:p504s在ph9.0的edta-tris缓冲液中修复20min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;p63在ph9.0的edta-tris缓冲液中修复30min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;ki-67在ph9.0的edta-tris缓冲液中修复25min阳性信号最强,阳性细胞比率最高;cd10在不同ph值的缓冲液中修复20min或25min效果相同,都能得到最强表达.结论:不同的抗原有其各自最适合的抗原修复液、ph值范围和最适修复时间.相对来说,高ph值的edta-tris缓冲液的修复效果要优于低ph值的修复液.