电镜和荧光显微技术在细胞凋亡研究中的应用

？目的:探讨荧光显微技术在检测细胞凋亡中的作用.方法:应用拓扑异构酶ⅱ抑制剂vp-16及化学毒物叠氮钠分别诱导hl-60细胞凋亡和死亡,用透射电镜和经hoechst33258染色的荧光显微镜对凋亡及死亡动态观察和定量分析.结果:hl-60细胞在vp16处理后,荧光显微镜下可见核浓缩、染色质凝聚、核碎裂等凋亡特征;而叠氮钠诱导的细胞死亡则出现核溶解、核染色质弥散,但无上述改变;两者电镜的观察与荧光显微镜的改变一致;凋亡细胞及坏死细胞荧光显微镜下呈不同的形态特征.对处理的不同时间点细胞的荧光显微镜观察发现:处理后4h核形态开始变化,有核浓缩的细胞比例在处理的8h达高峰,然后下降,核碎裂细胞的比例在24h达高峰,约占80%,表明核浓缩发生在核碎裂之前.结论:荧光显微镜技术可明确观察判断细胞凋亡及坏死,并可进行动态及定量分析,是良好的凋亡检测方法.