光、磁分子探针在脑组织间隙内的扩散分布规律

？目的：对比荧光分子探针四甲基罗丹明-葡聚糖(dextran-tetramethylrhodamine,dt)和荧光黄(luciferyellowch,ly)、磁性分子探针钆-二乙三胺五乙酸(gadolinium-diethylenetriaminepentaaceticacid,gd-dtpa)在多孔介质中的动态扩散分布规律，筛选合适的荧光分子探针用于大鼠脑组织间隙(interstitialspace,iss)光学成像。方法：琼脂糖凝胶分为dt组、ly组、gd-dtpa组，分别导入相应分子探针，应用激光扫描共聚焦显微镜分别动态观察dt、ly在琼脂糖凝胶内的扩散分布，与磁共振成像显示的gd-dtpa在琼脂糖凝胶内的动态扩散过程进行比较。ly分别导入18只大鼠尾状核，对不同时间点离体脑切片进行荧光成像，其成像数据与相应导入gd-dtpa的大鼠的磁共振在体检测成像数据进行对比。结果：dt、ly及gd-dtpa在琼脂糖凝胶中的扩散分布均表现为各向同性，平均扩散分布速率分别为：(0.07±0.02)×10-2mm2/s、(1.54±0.47)×10-2mm2/s、(1.45±0.50)×10－2mm2/s，dt与ly、dt与gd-dtpa间差异均有统计学意义(anova,f=367.15,p＜0.001；post-hoclsd,p＜0.001)，ly与gd-dtpa间差异无统计学意义(post-hoclsd,p=0.091)。重复测量方差分析比较分子探针的扩散分布面积随时间变化的趋势：dt与ly、dt与gd-dtpa间的变化规律差异均有统计学意义(bonferroni校正,α=0.0125,p＜0.001)，ly与gd-dtpa间差异无统计学意义(bonferroni校正,α=0.0125,p=0.203)。ly与gd-dtpa在大鼠尾状核iss内分布随时间变化呈各向异性，均表现为指向同侧皮层区的单方向楔形扩散，平均扩散分布速率分别为(1.03±0.29)×10－3mm2/s和(0.81±0.27)×10－3mm2/s，t=0.759,p=0.490；信号衰减半衰期分别为(2.58±0.04)h和(2.46±0.10)h，t=2.025,p=0.113。ly与gd-dtpa间扩散分布面积比率在0.5、1、2、3、7h差异无统计学意义(t=2.249,p=0.088;t=2.582,p=0.061;t=1.966,p=0.121;t=0.132,p=0.674;t=0.032,p=0.976)，在11h差异有统计学意义(t=2.917,p=0.043)。结论：ly与gd-dtpa在多孔介质内的扩散分布规律一致，是iss荧光成像的适用分子探针，可用于脑iss的微观、宏观、离体检测。