蚯蚓脱氧核糖核酸酶纯化及酶学性质

？目的:从蚯蚓组织中纯化得到一种脱氧核糖核酸酶(取名为蚯蚓脱氧核糖核酸酶,简称ednase)并研究其酶学性质.方法:采用丙酮沉淀、离子交换层析、高效液相层析、sds-page电泳,毛细管等点聚焦电泳和基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱等方法.结果:经证实这种纯化方案的纯化倍数是137,酶得率为45.6%.ednase的相对分子质量约为63000.mg2+,mn2+和ca2+对酶活性有较强的抑制作用,而na+则轻微的提高酶的活性.在ph4.4～5.2的范围内ednase酶活性稳定,其最适ph值为4.8.该酶的最适温度为37℃,在40℃范围内酶具有较高的稳定性.ednase的等电点为6.20.在以小牛胸腺dna为底物的条件下,酶的km为1.52g/l,vmax为4.89mg/(ml·min).该酶可有效降解超螺旋质粒dna,线状λ-噬菌体dna和细菌染色体dna,对rna未见任何降解作用.结论:这种酶具有独特的酶学性质,不同于以往所知的脱氧核糖核酸酶.