mda-mb-453细胞中分离cd44+/cd24-/low和sp细胞及其wnt和notch通路状态分析

？目的:通过分离人类表皮生长因子受体2(humanepidermalgrowthfactorreceptor2,her2)过表达乳腺癌细胞mda-mb-453中的cd44+/cd24-/low和sp(sidepopulation)细胞亚群,探索其干细胞表型,同时分析其sp细胞亚群与wnt和notch信号传导通路中的关键蛋白([β-catenin和notch-1)基因扩增的关系,研究其sp细胞亚群与her2和人类表皮生长因子3(humanepidermalgrowthfactor3,her3)基因扩增的相关性.方法:应用流式细胞技术,检测her2过表达乳腺癌细胞mda-mb-453和her2阴性细胞mcf-7是否存在cd44+/cd24-/low细胞亚群和sp细胞亚群.应用逆转录多聚酶链式反应(rt-pcr)的方法检测mda-mb-453细胞中母β-catenin和notch-1的基因扩增情况,粗略比较在mda-mb-453细胞及其sp细胞亚群中β-catenin,notch-1,her2和her3蛋白基因扩增量的差异.结果:mda-mb-453细胞系未检测到cdm44+/cd24-/low细胞亚群,但可检测出sp细胞亚群.在mda-mb-453细胞和mcf-7细胞均可扩增到β-catenin和notch-1.β-catenin和notch-1的基因扩增在mda-mb-453细胞中低于其sp细胞哑群;然而,her2和her3的基因扩增在两个细胞亚群中是类似的.结论:sp细胞能够富集mda-mb-453乳腺癌干细胞.wnt和notch信号通路在mda-mb-453细胞中处于开放激活状态,这些信号传导通路可能与mda-mb-453乳腺癌干细胞的维持和活性相关.