人乙酰转移酶样蛋白的核仁定位及在肿瘤中的表达

？目的:探讨端粒酶调节相关蛋白--人乙酰转移酶样蛋白(halp)核仁定位的分子基础及相关功能.方法:利用免疫荧光及免疫电镜的方法检测half在hela及saos2细胞中的分布情况,通过rdna荧光原位杂交及免疫荧光观察halp与rdna定位关系,利用bna干扰的方法进一步证明其核仁定位性,通过基因重组构建包含不同长度片段的halp基因的真核表达质粒并转染细胞以探讨其核仁定位的分子基础,运用免疫组织化学的方法检测halp在多种肿瘤组织中的表达情况.结果:alp在hela及saos2细胞分裂间期主要定位于核仁,并与rdna有共定位.免疫电镜显示,halp主要位于核仁的颗粒区;rna干扰后halp在核仁区的染色明显减弱;其核仁定位由halp羧基端的功能域介导.halp蛋白表达于多种人肿瘤细胞(如平滑肌肉瘤、原始神经外胚叶瘤、神经母细胞瘤、黑色素瘤、前列腺癌及肾透明细胞癌)的核仁.结论:alp蛋白具有明显的核仁定位性,并由其特异性的功能域介导,halp可表达于多种肿瘤细胞的核仁,其意义值得进一步探讨.